1 材料與方法 

1． 1 材料與試劑 

有機(jī)磷水解酶( organophosphorus hydrolase，簡(jiǎn) 稱 OPH)(酶活性≥11 μmol /min·mg)，購(gòu)自北京森 根瑞亞公司;甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品( methyl parathion， 簡(jiǎn)稱 MEP;CAS 號(hào):298 － 00 － 0:購(gòu)自天津一方恒益 醫(yī)藥技術(shù)有限公司;磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化 鈉、三氯乙酸、碳酸鈉、無(wú)水乙醇、亞硝酸鈉等，均購(gòu) 自天津市福晨化學(xué)試劑廠;4 － 硝基苯酚，購(gòu)自成都 艾科達(dá)化學(xué)試劑有限公司;乙腈、丙酮(色譜純) 購(gòu) 自德國(guó) Merck 公司。 

1． 2 儀器與設(shè)備 

主要的儀器有:Bio － rad 酶標(biāo)儀(美國(guó)伯樂)、 Cp214 電子天平［奧豪斯儀器(上海) 有限公司制 造］、pHS － 3C 酸度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公 司)、YMDCY － 12S 水浴氮吹儀(上海育模儀器有限 公司)、HH － W600 數(shù)顯恒溫三用水箱(金壇市朗博 儀器制造有限公司);氣相色譜儀(帶氮磷檢測(cè)器， 備有毛細(xì)管柱，美國(guó) Thermo):TＲACE GC ULTＲA、 ＲE － 52A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)、 YDp － 02 型真空泵(上海育模儀器有限公司)、通風(fēng) 柜(北京歐世佳實(shí)驗(yàn)室家具有限公司)、QL － 861 型 旋渦混合器(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)、 YDp － 02 型 真 空 泵 ( 上海育模儀器有限公司)、 pHS － 3DW 型分析天平(上海儀電分析儀器有限公 司)。

2 結(jié)果與分析

隨著 pH 值的升高， 有機(jī)磷水解酶對(duì)甲基對(duì)硫磷的降解率不斷升高，當(dāng) pH 值為 8 時(shí)有機(jī)磷水解酶對(duì)甲基對(duì)硫磷的降解率 達(dá)到最高，為 95． 55% ，隨著 pH 值的繼續(xù)上升，有機(jī) 磷水解酶對(duì)甲基對(duì)硫磷的降解率逐漸下降。所以， 選擇 pH 值為 8 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。有 機(jī)磷水解酶對(duì)不同濃度甲基對(duì)硫磷進(jìn)行降解，在 1 ～ 1 000 μg /mL 濃度范圍內(nèi)降解產(chǎn)物對(duì)硝基酚 450 nm 下的吸光度與甲基對(duì)硫磷濃度呈線性關(guān)系， 回歸相關(guān)系數(shù) r 2 = 0． 999 1。

3 結(jié)果與討論 

通過對(duì)有機(jī)磷水解酶降解條件進(jìn)行優(yōu)化，得出 有機(jī)磷 水 解 酶 最 優(yōu) 的 農(nóng) 藥 降 解 條 件: 酶 濃 度 為 1 ∶ 1 000、pH 值為 8、降解溫度為 37 ℃、降解時(shí)間為 10 min。通過氣相色譜法測(cè)得有機(jī)磷水解酶對(duì) 1、5、 10 μg /mL 甲基對(duì)硫磷的降解率均達(dá)到 98% 以上， 因此在生產(chǎn)中有機(jī)磷水解酶可作為針對(duì)甲基對(duì)硫 磷的高效快速降解酶進(jìn)行推廣使用。另外，利用有 機(jī)磷水解酶對(duì)甲基對(duì)硫磷具有高效降解特性，建立 了一種簡(jiǎn)便快速檢測(cè)水果、蔬菜中甲基對(duì)硫磷殘留 量的新方法。

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