液相色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應(yīng)先用10 %左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。

　　液相色譜柱這幾種原因會導(dǎo)致柱壓升高

　　1、流動相的前處理

　　雜質(zhì)堵塞色譜柱進(jìn)口濾片，導(dǎo)致壓力升高。這往往是由于流動相沒有過濾，或雖已過濾但過濾不*，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。

　　2、樣品的沉淀

　　當(dāng)溶解樣品的溶劑與流動相不一致時，樣品進(jìn)入色譜柱，有時可能因溶解度降低而沉淀出來，造成壓力升高。

　　3、晶體的析出

　　使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出，造成流體阻力加大、壓力升高。

　　4、細(xì)菌或霉菌孳生

　　霉菌在流動相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長堵塞濾板，導(dǎo)致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

　　5、溶質(zhì)吸附

　　當(dāng)溶質(zhì)在柱子上有較強的吸附，且所用的流動相難以將它們洗脫時，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大和壓力升高。

　　6、流動相更換過度較快

　　當(dāng)改變流動相體系時，不*的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。

　　7、壓力脈沖

　　運行過程中，有時會產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。